小麦野生资源蕴藏着丰富的抗病基因,将这些优异基因导入普通小麦,可以极大丰富小麦抗病基因资源,推动小麦抗病育种的发展,实现绿色安全农业生产。
早在1988年,英国学者就将高大山羊草染色体片段转入普通小麦中,随后发现高大山羊草染色体片段中含有高抗小麦白粉病基因,并将其命名为Pm13。该基因对我国小麦白粉病表现出良好的抗性。由于携带Pm13基因的外源染色体片段与普通小麦重组率极低,而且此片段在普通小麦背景下遗传不稳定,容易在后代中丢失,所以在生产中没有大量应用。本研究利用高频诱导部分同源染色体重组基因ph1b解决了外源染色体与小麦部分同源染色体之间不能交换重组的难题,创制了111个中国春-高大山羊草3Sl染色体发生交换的重组体,将Pm13精细定位在3Sl短臂端部124.43 kb区间(图1)。然后结合转录组测序,EMS诱导感病突变体分析、VIGS、转基因和等位性测验验证,最终克隆了Pm13基因(图2)。Pm13基因编码激酶结构域融合MLKL_NTD结构域的一种新型激酶融合蛋白(图2),目前该类型的激酶融合蛋白尚未在植物抗病基因中报道。Pm13基因的克隆为拓展植物抗病分子机理奠定重要基础。此外,该研究还开发了2个Pm13基因功能分子标记(AelMLKL-1和AelMLKL-8),创制了携带Pm13的微小外源片段重组体,为小麦抗白粉病育种提供了优异新种质及配套的Pm13分子标记辅助选择技术。
图1. 来自高大山羊草的抗小麦白粉病基因Pm13的图位克隆
图2. EMS感病突变体、VIGS和转基因对Pm13基因进行功能验证
编辑/赵月 审核/郑文明